Consistencia del medio.
El metabolismo de los tejidos
puede modificarse dependiendo de las características del medio de cultivo
(líquido o semi-sólido). dependiendo de las características del medio de
cultivo (líquido o semi-sólido). En el caso de un medio sólido, la
concentración y calidad del ágar pueden tener importantes efectos en el
desarrollo del cultivo (hiperhidricidad, crecimiento lento, etc.). El cultivo
en medio líquido se utiliza cuando la propagación in vitro es desarrollada a
través de las siguientes vías. El cultivo en medio líquido se
utiliza cuando la propagación in vitro es desarrollada a través de las
siguientes vías:
- - Inducción de embriogénesis
- - Cultivo de protoplastos
- - Cultivo de suspensiones celulares
Otro aspecto importante a tener
en cuenta es la consistencia del medio de cultivo. Puede emplearse como
semisólido o líquido. El agente gelificante más empleado en el cultivo in vitro es el agar extraído de diversas
algas marinas. Las diferentes calidades existentes en el mercado modifican la
expresión morfogénica debido a que pueden contener sustancias inhibitorias o
promotoras del crecimiento. Tal es el caso del cultivo de hojas de Actinidia
chinensis, cultivadas en una solución de MS con el agregado de 0,1 mg.L -1 de AIA + 1 mg.L -1 de BAP, donde se observó una respuesta
morfogénica diversa según el tipo de agar seleccionado. Por ejemplo, cuando el
gelificante empleado fue Chubut-agar, de producción nacional, se observó una
gran diferenciación de yemas adventicias, mientras que con el agregado de agar
SIGMA R
sólo se indujo la proliferación de callo. En caso de seleccionar medios de
cultivo líquidos, la respuesta morfogénica observada varía de manera
considerable. El cultivo líquido es imprescindible cuando se busca promover la
morfogénesis indirecta a través de suspensiones celulares. Para ello es
necesario cultivar los callos en medio líquido con agitación para permitir que
las células se disgreguen y puedan diferenciar raíces, brotes o embriones
somáticos en forma aislada. La selección del medio de cultivo
líquido o sólido depende, además, de la especie empleada. En Cymbidium spp, por
ejemplo, se ha observado que el empleo de medio de cultivo líquido promueve una
mayor diferenciación de protocormos respecto del mismo medio gelificado. A su
vez, este proceso puede mantenerse durante varios subcultivos mientras que en
medio de cultivo gelificado se observó que los protocormos tienden a formar tallos.
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