viernes, 26 de octubre de 2012

2.3.4.2. DISECCION DEL EXPLANTE


Cultivar los explantes en una cámara de transferencia con aire estéril («gabinete de  flujo laminar»), localizada en un ambiente limpio  y no expuesta a corrientes de aire. De no disponer este equipamiento, se pueden sustituir  con cuartos esterilizados previamente  con luz ultravioleta (nunca exponerse a la luz  UV en forma directa). La mesada de trabajo  y las paredes del gabinete deben ser desinfectadas  previamente con etanol al 70%. De  la misma manera deben ser desinfectados  exteriormente todos los recipientes (conteniendo medios de cultivo, agua, etc.) que ingresen  en el área del aire estéril. Los operarios constituyen frecuentemente una importante fuente primaria de contaminación, porque es recomendable que, antes de comenzar a trabajar laven sus manos  y antebrazos con abundante agua y jabón y se des infecten con etanol al 70 %. La  utilización de guardapolvos, guantes y máscaras protectoras de la boca y de la nariz, así  como los gorros protectores de los cabellos, ayudan a reducir sensiblemente los niveles de  contaminación. Los instrumentos de trabajo (pinzas, pipetas, tijeras, agujas, cápsulas de Petri)  deben ser esterilizados antes de su uso. Muchos  de estos instrumentos pueden ser colocados  en etanol al 95% y, antes de ser usados,  se deben flamear cuidadosamente en  la llama de un mechero. También es necesario  flamear la boca de los recipientes que contienen  los medios de cultivo antes y después  de cultivar el explante. Incubar los cultivos en cámaras o cuartos  de cultivo, cerrados, libres de corrientes de aire y bien higienizados. En lo posible se debe restringir la circulación de personas, y  los recipientes con cultivos contaminados  deben ser rápidamente eliminados de este  sector. Es conveniente que antes del lavado,  estos cultivos sean esterilizados.


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